Донорский материал для кератопластики

История развития кератопластики, неудачи на первом этапе и последующие значительные успехи тесно связаны с качеством, происхождением, способом взятия и хранения донорского материала.

Получение качественного донорского материала для сквозной кератопластики было и остается одной из кардинальных проблем в пересадке роговицы во всем мире. Еще В.П. Филатов в свое время писал: «Получение глаз в достаточном количестве на местах - не всегда легкое дело. А поэтому необходимо обеспечить снабжение пунктов, где идет широкая работа по пересадке из больших городов. Крупные города должны взять на себя снабжение периферии глазами, удовлетворив, конечно, прежде всего потребность в пересадочном материале имеющихся в них глазных клиник и институтов».

В настоящее время организован ряд глазных банков в Москве, в МНТК «Микрохирургии глаза» им. акад. С.Н. Федорова, НИИ глазных болезней РАМН, МНИИ глазных болезней им. Гельмгольца, в Самарской клинике глазных болезней и Уфимском НИИ глазных болезней.

Комиссия по Глазным банкам при Евросоюзе в 2003 году определила следующие направления в деятельности глазного банка:

■ глазной банк осуществляет организационно-методическую работу;

■ глазной банк осуществляет забор и учет донорского материала в патолого-анатомических отделениях;

■ глазной банк производит консервацию роговиц и донорских тканей в различных режимах и средах;

■ глазной банк осуществляет контроль качества сред, консервации и проверки жизнеспособности донорских роговиц;

■ глазной банк решает вопросы распределения и перераспределения донорских роговиц по другим глазным банкам при избыточном накоплении;

■ глазной банк осуществляет разработку методов тканевой и клеточной фармакологической защиты донорских роговиц;

■ глазной банк решает научные вопросы по проблеме донорства и трансплантации роговиц.

Европейской конференцией по банкам роговиц в 1990 году приняты условия, при которых невозможно использовать донорские роговицы, а именно:

1. Болезни предполагаемых доноров, которые могут подвергнуть опасности не только реципиента, но и медицинский персонал:

- активный вирусный гепатит;

- СПИД или ВИЧ- серопозитивность;

- активный вирусный энцефалит или энцефалит неясного генеза;

- болезнь Крейтцфельда - Якоба;

- бешенство.

2. Болезни предполагаемых доноров, которые могут подвергнуть опасности реципиента:

- сифилис;

- серопозитивность на гепатит В и С;

- СПИД или ВИЧ- серопозитивность;

- активный вирусный гепатит;

- желтуха неясного генеза;

- бешенство;

- лейкемия;

- ретинобластома;

- септицемия любой этиологии;

- заболевания ЦНС неясной этиологии;

- болезнь Крейцфельда - Якоба.

3. Изменения донорского глаза вследствие его заболеваний (опухоли, воспалительные поражения, дистрофические изменения, хирургические вмешательства).

При энуклеации глазного яблока у трупа необходимо соблюдать следующие требования: перед извлечением глаза кожу век и носа обрабатывают тампоном, смоченным в 70% этиловом спирте, руки врача, проводящего энуклеацию, должны быть стерильными и в стерильных перчатках, инструменты для энуклеации простерилизованы.

Перед операцией в конъюнктивальный мешок закапывают 2-3 капли антибиотиков.

Извлеченный глаз помещают в стеклянную баночку (бюкс) с притертой крышкой, роговицей вверх, на баночку наклеивают этикетку с паспортными данными и номером трупа. Одновременно с энуклеацией глаз у трупа берут кровь из сердца. Шприц и игла одноразовые. Вкол иглы производят в третьем межреберье, немного отступая от грудины влево. Иглу направляют кнутри и книзу. Для анализа достаточно взять 5 мл крови и отправить в лабораторию для исключения сифилиса, ВИЧ-инфекций и гепатитов.

Необходимо соблюдать при этом одно условие - максимально щадить лицо умершего. Этого достигают введением в полость глазницы после энуклеации ватного шарика и глазного протеза, а также наложением на веки скрытых швов.

Баночку с глазами помещают в холодильник с температурой +2°- +4°С. Необходимо следить, чтобы температура не опускалась ниже 0°С. Оптимальным для консервации глаз трупа является срок 2-3 суток. Таким образом, происходит консервация по В.П. Филатову.

Офтальмологи Mc Carey и Kaufman в 1974 году создали раствор для консервации, условно названный средой «МК», которая дала возможность обеспечить надежную консервацию роговицы до 4 суток. В среду «МК», содержащую декстран и антибиотики, помещали не глазное яблоко, а иссеченный корнеосклеральный трансплантат и хранили при температуре +4°С.

Более поздние разработки позволили увеличить срок консервации до 10 суток, используя такие среды как «К-SOL», Дексол, Оптисол, хондроитина сульфат.

В глазном банке МНТК «Микрохирургии глаза» им. акад. С.Н. Федорова успешно используется питательная среда Борзенка - Мороз для консервации роговицы при температуре +4° - +8°С. Гипотермический метод с использованием питательной среды Борзенок - Мороз позволяет сохранять донорскую роговицу в жизнеспособном состоянии практически без потери плотности эндотелия до 4 суток для сквозных кератопластик и до 11 суток для мелиоративно-тектонических целей.

В глазном банке Самарской клинической офтальмологической больнице им. Ерошевского для консервации донорских роговичных дисков используются 3 методики: консервация во влажной камере при температуре +4°С, высушивание над силикогелем и сохранение роговиц при температуре +4°С в средах, содержащих хондроитина сульфат.

В глазном банке НИИ глазных болезней РАМН для консервации донорских роговиц используют среды «МК», «К-SOL» и питательную среду «А-среда», разработанную сотрудниками глазного банка для срока хранения от 4 до 7 суток и обеспечившую сквозной кератопластике более высокие результаты, чем при использовании сред «МК» и «K-SOL».

Качество донорского материала определяется с помощью биомикроскопии, роговичной энодотелиальной эндоскопии и адреналинового теста. Роговицу энуклеированного глазного яблока необходимо изучить сразу же после забора, перед консервацией и перед операцией, с помощью щелевой лампы или операционного микроскопа, обращая внимание на размер роговицы, ее форму, прозрачность, отсутствие рубцов и зон повреждения, васкуляризации, складок десцеметовой оболочки.

Необходимо провести осмотр и подсчет эндотелиальных клеток роговицы с помощью эндотелиального микроскопа, обращая внимание на то, что эндотелиальные клетки должны быть правильной гексогональной формы и плотностью не менее 2500 клеток на мм2, а после консервации потеря эндотелиальных клеток не должна превышать 12%. Особенно это нужно строго учитывать при сквозной кератопластике.

Сотрудниками глазного банка МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова разработан адреналиновый тест, который позволяет определять жизнеспособность донорского материала. Суть метода заключается в инстилляции на поверхность роговицы 0,2-0,3 мл 0,1% раствора адреналина гидрохлорида. Оценка результатов адреналиновой пробы проводится по времени появления первых признаков мидриаза. Начало мид- риаза от 5 до 10 минут позволяет применять эти донорские роговицы для сквозной кератопластики, при 15 и более минут - только для мелиоративно-тектонических кератопластик.

Более подробно ознакомиться с материалами о заготовке и консервации донорских роговиц можно в докторской диссертационной работе «Медико-технологические и методологические основы эффективной деятельности глазных тканевых банков России в обеспечении операций по сквозной трепанации роговицы» С.А. Борзенок.

Литература

1. Беляев В.С., Краснов М.Л. Руководство по глазной хирургии. - М., 1988. - 623 с.

2. Борзенок С.А. Медико-техническая система Глазного банка ГУ МНТК «Микрохирургии глаза» им. акад. С.Н. Федорова // Сборник научных статей «Новые технологии в лечении заболеваний роговицы». - М., 2004. - С. 418-426.

3. Дронов М.М. Руководство по кератопластики. - Санкт-Петербург, 1997. - 130 с.

4. Ерошевский Т.И. Пересадка роговицы. - Куйбышев, 1961. - 327 с.

5. Магильницкий С.Г. Вестник офтальмологии. - 1960. - № 2. -

С. 48.

6. Морхат И.В. Интерламеллярная кератопластика. - Минск: «Беларусь» - 1980. - 110 с.

7. Слонимский Ю.Б. Столетие сквозной пересадки роговицы. Сборник научных статей «Современные методы диагностики и лечения заболеваний роговицы и склеры». - М. 2007. - т. 2. - С.147-152.

8. Фейгин Х. Военно-медицинский журнал. - 1867. - Ч. 99. - С. 176; август. С. 309; Ч.100. - сентябрь. - С.1.

9. Филатов В.П. Мои пути в науке. - Одесское областное изд., 1955. -

162 с.

10. Munchaw W. Zur Vorgeschicht der Keratoplastik. - Klin. Mbl. Augen. - 1968. Vol. 152. - № 3. - S. 438-444.

11. Sarenko B. De affektion okulorum cocachymia. - Petropoli, 1854.

12. Zirm E. Eineerfolgreiche total keratoplastik. - Greofes Arch. f. Oph- thal. - 1906. - 64. - № 3. - S. 590-593.

13. Xie Lixin, Shi Wti Yun. Cornea. - Beiying, China. - 2007. - 633p.