Получение накопительной культуры азотфиксаторов
Для накопления свободноживущих азотфиксаторов используют среду Эшби, не содержащую минеральных и органических источников азота. Среду разливают в колбы слоем 1-1,5 см, заражают почвой и инкубируют при температуре 28-30 °С.
Через 5-7 суток на поверхности среды образуется жирная пленка, сначала серовато-белая, а затем постепенно буреющая. Микроскопи- руя пленку, можно обнаружить клетки азотфиксирующих бактерий.Задание
Изучить особенности морфологии бактерии семейств Azotobacteriaceae и Rhizobiaceae.
План выполнения работы
1. Приготовить и рассмотреть с иммерсионной системой прижизненный препарат из накопительной культуры Azotobacter.
2. Выявить капсулу методом негативного контрастирования. Для этого каплю исследуемой культуры поместить в каплю разбавленного фуксина, а
затем смешать с каплей туши и закрыть покровным стеклом. Тушь заполняет
пространство, окружающее клетки, в результате чего хорошо видны не окрашивающиеся капсулы.
3. Приготовить и просмотреть прижизненный препарат бактерий из
клубенька бобового растения.
4. Сделать зарисовки.
Вопросы для самостоятельного контроля
1. Как происходит процесс фиксации азота у бактерий? В чем заключается экологическое и практическое значение фиксации азота?
2. В какой клеточной структуре находятся гены, кодирующие нитроге- назный комплекс?
3. Какие представители относятся к свободноживущим азотфиксаторам?
4. Какими признаками характеризуется род Azotobacter?
5. Какие представители относятся к симбиотическим азотфиксаторам?
6. Как происходит образование корневых клубеньков? Что такое бактероиды?
7. Какую функцию выполняет леггемоглобин в клубеньках бобовых
растений?
8. Какое влияние оказывает кислород на процесс фиксации азота?
9. Как получают накопительные культуры азотфиксаторов?
10. Какие функции выполняют капсулы азотобактера? Какими методами можно выявить капсулы при микроскопировании?