Определение содержания клетчатки

При характеристике пищевой активности различных сапрофагов важным показателем является их способность разлагать клет­чатку. Моллюски, диплоподы, мокрицы, личинки двукрылых, энхитреиды известны как активные разрушители целлюлозы.

Содержание клетчатки определяют по количеству моносаха­ридов, образующихся при гидролизе клетчатки в концентриро­ванной серной кислоте. Модификация этого известного метода применительно к малым навескам мертвых растительных тканей и экскрементов разработана Б. Р. Стригановой (1970).

Для определения используется материал, высушенный до по­стоянного веса, размельченный и просеянный через сито с диа­метром отверстий 0,25 мм. Пробу весом 10—20 мг помещают в химическую пробирку и заливают 2 мл 80%-ной серной кислоты. Смесь тщательно размешивают стеклянной палочкой и оставля­ют на полтора часа для полного растворения клетчатки в кисло­те. Затем смесь переносят в колбу и доливают туда около 100 мл воды. Колбу ставят в кипящую водяную баню на 2 часа, в течение которых происходит полный гидролиз клетчатки. По­сле этого смесь охлаждают и центрифугируют в течение 15 мин. При 3 тыс. об/мин. Центрифугат доводят водой в мерной колбе до 100 мл и затем определяют в нем содержание глюкозы с по­мощью антронового реактива.

Состав антронового реактива: 200 мг антрона, 8 мл абсолют­ного этилового спирта, 30 мл дистиллированной воды и 100 мл концентрированной серной кислоты (уд. вес 1,94).

В химическую пробирку помещают 1 мл центрифугата и 10 мл антронового реактива. Содержимое пробирок перемешивают и нагревают на водяной бане в течение 7 мин. После этого пробир­ки сразу же охлаждают и их содержимое фотометрируют при длине волны 620 ммк. Концентрация глюкозы определяется по калибровочной кривой.

В растительных остатках разной степени разрушения всегда имеется некоторое количество моносахаридов и дисахаридов. Д|ля определения исходного их содержания в исследуемом материале навеску 10—15 мг суспензируют в 10 мл дистиллированной воды, нагретой до 50°, в течение 10 мин. Затем смесь фильтруют и определяют в фильтрате содержание глюкозы антроновым мето­дом.

При определении глюкозы, образующейся в результате гидро­лиза клетчатки, следует вычесть из общего количества глюкозы в первом гидролизованном растворе исходное количество глюко­зы, рассчитанное на единицу сухого веса материал'а.

Содержание клетчатки (Ц), по расчету А. Р. Кизеля (цит. по Иванову, 1946), составляет 0,9 от количества глюкозы (Г). Г: Ц= =0,9. Для сравнения содержания клетчатки в разных видах растительного опада ее количество выражают в процентах от

115

воздушно-сухого веса. Для каждого варианта опыта необходимо определение содержания клетчатки не менее чем в 5 повторно­стях.