Микрофлора воздуха
Воздух не является местом обитания микроорганизмов, но служит местом их повсеместного распространения: там, куда поступает воздух, могут быть и микроорганизмы. Обилие солнечных лучей приводит к их массовой гибели, а отсутствие источников питания исключает возможность размножения.
Однако в атмосфере всегда содержится определенное количество жизнеспособных клеток, которые вместе с пылью поднимаются в воздух, а затем вновь оседают на поверхность земли. Повсеместное распространение микроорганизмов воздушными потоками составляет часть так называемой микробиологии атмосферы. Фактор географической изоляции, столь важный для животных и растений, для бактерий и грибов практически не имеет значения.В составе твердых частиц в аэрозолях всегда присутствуют микроорганизмы. Над сушей это главным образом споры грибов, над морем - преимущественно бактерии. В воздухе над крупными городами микроорганизмов гораздо больше, чем в сельской местности или в лесу; летом больше, чем зимой. Особенно чистый воздух над морями, горами, ледяными полями Арктики и Антарктиды, где в 1 м3 воздуха содержатся единичные клетки.
Количество микроорганизмов в воздухе уменьшается по мере удаления от поверхности земли. Верхняя граница жизни пока на установлена.
Видовой состав микрофлоры атмосферы носит случайный характер и потому сильно колеблется. Среди микроорганизмов преобладают пигментные формы стрептококков, сарцин и дрожжей, которые более устойчивы (за счет наличия каротиноидов) к ультрафиолетовым лучам, а также споры бактерий и грибов.
Очень богат микроорганизмами воздух закрытых помещений, особенно таких, где неизбежно массовое хождение людей, сопровождающееся поднятием пыли. Например, в школах до занятий численность бактерий обычно не превышает 2 тыс. в 1 м3, а после занятия - десятки тысяч.
В воздухе жилых помещений, поликлиник и больниц обнаруживаются в значительном количестве болезнетворные микроорганизмы, которые неустойчивы к действию света и высушиванию, поэтому большинство из них гибнет.
Однако туберкулезные палочки, патогенные стрептококки и стафилококки хорошо переносят высушивание, в связи с этим воздух может быть источником инфекционных заболеваний.Санитарно-микробиологический анализ воздуха
Санитарная оценка воздуха помещения осуществляется по двум микробиологическим показателям: общему количеству бактерий и количеству санитарно-показательных микроорганизмов в 1 м3 воздуха. Для обнаружения микроорганизмов в воздухе предложено большое количество методов и приборов, позволяющих определять как общее количество, так и состав микрофлоры. В основу методов положены два принципа: оседание (седиментация) и засасывание (аспирация). Простейший - метод Коха, основанный на оседании микроорганизмов, капелек жидкости и пылинок под влиянием силы тяжести на поверхность агара открытой чашки Петри. Метод Кротова основан на ударно-прибивном действии струи исследуемого воздуха, проводится с помощью прибора Кротова.
Ни один из предложенных методов не позволяет уловить и подсчитать все микроорганизмы, лучше использовать сочетание нескольких методов.
Бактериальная загрязненность воздуха определяется по количеству колоний, выросших в чашках Петри на МПА. В.Л.Омельянским установлено, что за 5 минут при спокойном состоянии воздуха на площадь в 100 см2 оседает приблизительно столько микроорганизмов, сколько их содержится в 10 л воздуха. Рассчитав площадь питательной среды в чашке, и зная количество выросших на ней колоний микробов, можно определить количество микроорганизмов, содержащихся в 1 м3 воздуха.
Критерии чистоты воздуха следующие: в воздухе операционных не допускается присутствие микроорганизмов. Микробное число для пищевых учреждений - не более 500 клеток в 1 м3, для жилых помещений - до 1500 клеток в 1 м3.
Санитарно-показательными микроорганизмами для оценки чистоты воздуха служат гемолитические стрептококки и стафилококки - постоянные обитатели верхних дыхательных путей, слизистой носа и ротовой полости человека. Это Streptococcus viridans - зеленящий стрептококк, Streptococcus haemolyticus - гемолитический стрептококк и Staphylococcus aureus - золотистый стафилококк.
В качестве диагностической среды для их выявления используют кровяной агар. Зеленящий стрептококк имеет вокруг выросших колоний положительную зону неполного просветления с позеленением среды. Гемолитический стрептококк образует на поверхности кровяного агара колонии, окруженные зоной гемолиза.
Воздух считается чистым, если в 1 м3 воздуха содержится летом не более 4 стрептококков, зимой - не более 16. Загрязненным воздух считается, если в 1 м3 воздуха содержится летом более 32 стрептококков, зимой - более 56. Золотистый стафилококк используется в качестве санитарнопоказательного микроорганизма в хирургических палатах и родильных домах. В 250 л воздуха не должно содержаться ни одного стафилококка.
Задание
1. Определить общее микробное число для воды из водопроводной сети и аквариума.
2. Определить общее микробное число для воздуха в помещении методом Коха.
3. Оценить санитарно-микробиологическое состояние анализируемых объектов.
План выполнения работы
Посев микроорганизмов на чашки Петри (2 часа):
1. Разлить расплавленную и остуженную до 45-50 °С питательную среду в стерильные чашки Петри. После застывания агара чашку Петри открыть полностью и выдержать в течение 5 минут в исследуемом помещении. Затем чашку закрыть, поместить дном вверх в термостат и культивировать 5-7 дней при 27-30 °С.
2. Для определения количества микроорганизмов в 1 мл аквариумной воды приготовить 10-кратное разведение от 1:10 до 1:1000. Затем 0,1 мл из соответствующего разведения, начиная с большего, внести в стерильные чашки Петри с застывшей агаризованной средой и шпателем равномерно распределить по поверхности. Чашки культивировать в термостате вверх дном при температуре 27-30 °С.
3. Аналогично провести посев микроорганизмов из водопроводной воды. Для этого отобрать пробу воды в стерильную колбу и внести 0,1 мл в чашки с застывшей агаризованной средой.
Количественный учет микроорганизмов и оценка санитарного состояния воды и воздуха (2 часа):
1.
Для определения общего микробного числа в анализируемом воздухе и пробах воды подсчитать количество выросших колоний на чашках и сделать пересчет на 1 м3 воздуха и 1 мл воды. Оценить степень чистоты воздуха и качество воды по нормативам общего микробного числа.2. Провести анализ выросших колоний: подсчитать количество бактерий и грибов, пигментированных бактерий, споровых и неспоровых форм. Приготовить прижизненные препараты из некоторых колоний, промикроско- пировать. Ознакомиться с морфологией клеток (форма, подвижность, взаимное расположение), зарисовать.
Вопросы для самостоятельного контроля
1. Какие факторы оказывают влияние на развитие микроорганизмов в почве?
2. Какими признаками характеризуются аллохтонные и автохтонные микроорганизмы? Кем было предложено такое разделение?
3. Какие факторы оказывают влияние на численность микроорганизмов в водоемах?
4. Какие виды загрязнений почвы и воды относятся к наиболее опасным? Как происходит самоочищение почвы и воды?
5. Как можно определить численность микроорганизмов в почве?
6. Как проводится санитарно-микробиологический анализ воды?
7. Какие микроорганизмы относятся к санитарно-показательным? Что они характеризуют?
8. Какие показатели характеризуют чистоту водоемов и питьевой воды?
9. Какие микроорганизмы могут присутствовать в воздухе? Как определить их количество?
10. Какие существуют критерии чистоты воздуха?