МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ЗОЛЬНОГО СОСТАВА ПОЧВЕННЫХ животных
Л. Д. Покаржевский
Исследования зольного состава почвенных животных и их пищи теснейшим образом связаны с проблемами приспособляемости организмов к почвенно-химическим условиям, сукцессионных изменений в биогеоценозе, средопреобразующей деятельности животных и роли организмов в круговороте вещества в биогеоценозе.
С точки зрения эволюции живого вещества химический элементарный состав организмов, в том числе и насекомых, интенсивно изучался с 20-х годов нашего столетия в Биогеохимической лаборатории АН СССР под руководством академика В. И. Вернадского (работы А. П. Виноградова, X. Г- Виноградовой-Томашевской, Т. Ф. Боровик-Романовой). Классическим в этой области изучения живого вещества является труд академика А. П. Виноградова «Химический элементарный состав организмов моря». Сведения о зольном составе насекомых можно также найти в других работах отечественных и зарубежных авторов (Кузнецов, 1948; Войнар, I960; Пономаренко и др., 1974; Uvarov, 1929; Clark, 1957; Reichle et al., 1967, 1969).
Изучение роли животных в биогеоценозах (и в первую очередь почвенных животных как агентов почвообразования) повлекло за собой исследования роли животных в миграции и кругообороте зольных элементов. Пионерными в этой области следует считать работы Н. А. Димо (1916), С. И. Пономаревой (1948) и М. С. Гилярова (1957). Влиянию почвенных животных на миграцию химических элементов в биогеоценозе-посвящены многие работы (Соколов, 1957; Абатуров, 1966; Малоземова, Корума, 1973; Jakubczyk et al., 1972; Gaspar, 1972). Имеется большое количество исследований по накоплению и миграции радиоактивных изотопов, многие из которых в биогеоценозе аналогичны важнейшим химическим элементам. Есть работы и по почвенным животным (Передельский и др., 1960; Krivolutsky et al., 1972; Crossley, 1963; Reichle, Crossley, 1967, и др.). Одйако до сих пор остается в тени изучение роли животных в 'миграции нерадиоактивных химических элементов (в том числе и биологически необходимых), таких, как фосфор, сера, калий, кальций и др.
Достаточно взглянуть на нижеприведенные данные (по Криволуцкому, Покаржевскому, 1974), чтобы убедиться, на-248
сколько роль почвенных животных в накоплении и миграции химических элементов велика по сравнению с другими животными:
Компонент биогеоценоза | Масса сухого вещества, г/м* | Кальций, ■ |
Почва, слой 5 см | 25000 | 250000 |
Растения | 10 000 | 50 000 |
Подстилка и опад | 6000 | 10 000 |
Животные (всего) | 7,9 | 47 |
Простейшие | 1,0 | 8,0 |
Нематоды | 0,5 | 4,0 |
Энхитреиды | 0,5 | 4,0 |
Дождевые черви | 0,75 | 8,8 |
Микроартроподы | 1,5 | 5,0 |
Насекомые | 2,5 | 7,5 |
Пауки, моллюски | 1,0 | 5,0 |
Беспозвоночные (всего) | 7,75 | 42 |
Позвоночные (всего) | 0,14 | 5,0 |
Такие важные потребители опада, как кивсяки, при численности 100 особей-на 1 м2 могут только с линьками возвратить в почву до 60 кг кальция (рассчитано по Бызовой, 1970). Несомненно, что столь активное участие почвенных животных в миграции зольных элементов требует большего внимания, так как почвенные животные влияют, по-видимому, в первую очередь на скорость возврата химических элементов из подстилки в почву.
Прежде чем перейти к освещению методов определения химических элементов в иочвенных животных, необходимо дать характеристику химических Элементов и порядок их концентрации в почвенных животных.
Зольность почвенных животных в большей мере зависит от содержания кальция. У насекомых и их личинок она колеблется от 3 до 12%, у пауков составляет 4%, у хилопоД — 7%, каль- кофильных изопод и диплопод—30—40% и в раковине моллюсков достигает 83% (Edwards, Reichle, Crossley, 1970). Основу золы составляют кальций, калий, магний, фосфор, натрий, кремний, сера. Это так называемые «макроэлементы». Содержание' их в животных равно 10-2— 10% от сухого веса. Железо, медь, марганец, алюминий, бор, молибден, кобальт, никель, иод, бром, цинк, литий, цезий, рубидий, стронций, барий, ванадий, хром, свинец, фтор, мышьяк носят общее название «микроэлементы» и встречаются в животных в концентрациях 10~5— 10-3%. Необходимо отметить, что многие микроэлементы входят в состав промышленных отходов и загрязнений. Порядок концентрации других элементов в животных пока точно не определен, а всего в животных встречается 66 элементов (Ковальский, 1971).
Влияние недостатка или избытка различных химических элементов в питании животных в природных условиях рассматривалось только на сельскохозяйственных животных и микроорга-
,0 Заказ № 4572
249
•низмах в связи с эндемическими заболеваниями и изучением биогеохимических провинций (Виноградов, 1949; Войнар, 1960; Ковальский, 1974). Почвенные животные в этом отношении практически не изучены.
Методы определения химических элементов зависят от количества элемента в пробе и его аналитических свойств.
Одной из важнейших частей работы то определению зольно- >го состава биологических материалов является подготовка про- бы к анализу. Собранный для химических анализов материал должен быть тщательно очищен от примесей. Кишечники беспозвоночных должны быть очищены от содержимого. Это достигается или выдерживанием животных без пищи во влажной ткани в течение двух суток или, по методу Буше, проталкиванием капроновой лески с оплавленным концом через пищевод (дождевые черви, личинки щелкунов).
Вскрывать животных не рекомендуется, так как с жидкостями тела теряются и химические элементы. Кивсяков и мокриц нужно выдержать сутки без пищи. Высушивание проводится в почвенных стаканчиках или в пакетах из оберточной бумаги в сушильном шкафу при температуре 105°С до постоянного веса. Насекомых, мокриц, кивсяков перед этим замаривают эфиром, а дождевых червей и личинок типулид подсушивают в бюксах с сухой фильтровальнойбумагой, а затем переносят в почвенные стаканчики.
При подготовке проб к определению микроэлементов материал собирается и сушится в пакетах из пергамента, кальки или в пластмассовых стаканчиках, так как другие материалы загрязняют подготавливаемые пробы (Зырин и др., 1971). Фиксированные материалы использовать не следует. Высушивание и озоление лучше проводить сразу после сбора животных и определения их видовой принадлежности. Пробы можно сушить и при температуре 50°С, но это удлиняет время сушки. При 105°С постоянный вес пробы величиной 200 ім-г живого веса достигается примерно через 6 часов. Не следует применять температуру выше 105°С. Перед взвешиванием пробы охлаждают в эксикаторе, на дно которого ставят бюкс с хлористым кальцием или гранулированной щелочью. •
Для определения^ макроэлементов достаточны навески 50— 100 мг сухого веса, для имаго насекомых в 2—3 раза больше. Озоление проб ведется сухим или мокрым способом. Сухое озоление в муфельной печи ведется при температуре не выше 450°С (Стриганова, см. статью в наст, сб.) до получения светлой золы в фарфоровых или платиновых тиглях. Однако в фарфоровых тиглях при долгом, использовании происходит приплавление частиц золы к глазури, в результате чего тигль, становится непригодным для использования.
Мокрое озоление ведется в смеси концентрированных кислот (азотной и серной) или в серной концентрированной кислоте. При определении фосфора нередко пользуются мокрым озоле-
250
ниєм в кипящей (203° С) 70%-ной хлорной кислоте, которая гидролизует органические соединения. Однако при мокром озолении опасно загрязнение проб примесями в реактивах. Пожалуй, лучшим является озоление по методу Г. Я. Ринькиса. Пробу обугливают в течение 15—'20 мин. в муфельной печи или па мощной электроплитке при температуре 400° до прекращения
Рис. 1. Установка Ринькса для озоления проб (по Лебедеву, Усовичу, 1969)
/ — колба со шлифом;
2 — тигль с пробой;