3.2.5. Определение МИК хитозана
Таблица 16. Определение МИК хитозана в зависимости от Мп (в %)
|
Тест культура |
Mr) хитозана |
|||||
|
7кДа |
ИкДа |
96кДа |
4 кДа |
24кДа |
396 кДа |
|
|
М. smegmatis |
1,7-10'3% |
2,5-10л% |
0,1% |
9-1(Г4% |
5-10'2% |
gt;1% |
Из таблицы видно, что хитозан с Мл 96 кДа ингибировал рост клеток М. smegmatisв концентрации 0,1 %. Результаты исследований показали, что хитозан с Мл 396 кДа в исходной концентрации 1% не угнетал рост клеток микобактерий. Эффективность антибактериальной активности низкомолекулярных образцов хитозана при воздействии на культуру М smegmatisсоставляла 0,001-0,005%. Наибольшую чувствительность клетки микобактерий проявляли к действию хитозана с Мл, 4 кДа в концентрации 9-10'4%.
Таким образом, можно заключить, что культура М. smegmatisчувствительна ко всем низкомолекулярным препаратам хитозана с Mr) 4-24 кДа, как крабового происхождения, так и к хитозану из восковой моли.
Результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что хитозан обладает, как минимум, бактериостатическим действием по отношению к94
микобактериям. Это позволяет рекомендовать применение этих препаратов (после проведения дальнейших экспериментов in vivo) для профилактики и лечения туберкулеза человека и животных.
3.2.6. Изучение антибактериальных свойств хитозана с отрицательным
зарядом
Известно, что высоко реакционноспособные положительно заряженные NH2 группы хитозана способны взаимодействовать с анионными группами поверхности клетки и за счет электростатических и ионных взаимодействий формировать полиэлектролитные комплексы с компонентами бактериальной поверхности, вызывая их гибель [229,121]. Следовательно, можно предположить, что хитозан, обладающий отрицательным зарядом не должен оказывать на микроорганизмы антибактериального воздействия.
Для проверки этого вывода была проведена серия опытов, в которых клетки М. smegmatisподвергали обработке препаратами хитозана, имеющими
отрицательный заряд:
- N- сукцинил хитозан
- сульфат хитозан
- карбоксиметил хитозан
Результаты экспериментов показали, что ни у одного из исследуемых препаратов хитозана антибактериальных свойств выявлено не было, (данные не приводятся). Полученные результаты согласуются с результатами Кочкиной З.М. [230], отметившей, что маскирование заряда положительного заряда фрагментов хитозана отрицательно заряженными сульфогруппами (в сульфате хитозана) или перемена знака заряда на противоположный (в N -сукцинил хитозане) ведет фактически к утрате антибактериальных свойств производных хитозана.