3.2.4. Определение прочности связывания хитозана с клетками
M.smegmatis
Для определения прочности связывания хитозана с клетками M.smegmatisиспользовали трехкратную отмывку клеток бактерий предварительно проинкубированных при температуре 37°С с хитозаном с Мг| равной 4 кДа и СД 85%, смесью из 0,1 М ацетатного буфера (рН 6,8) и 0,5 М NaCl. Результаты предварительных опытов показали, что 0,5 М NaCl не вызывает гибели микобактерий. В то же время не исключено, что хлорид натрия способен разрушить ионные взаимодействия, возникшие в течение 1-часовой инкубации между клетками М. smegmatisи хитозаном, вследствие чего хитозан перейдет в супернатант, и, как следствие, после отмывки количество жизнеспособных клеток увеличится. Однако данные этого опыта показали, что воздействие хлорида натрия не оказывает существенного влияния на связывание хитозана с микобактериями. Выживаемость клеток осталась без изменений (результаты не приводятся).
В результате колориметрических исследований было показано, что количество хитозана в супернатанте было минимальным, то есть практически весь хитозан остался связанным с микобактериями. Таким образом, можно сделать вывод, что хитозан в силу своей поликатионной природы, прочно связан с внешней мембраной микобактерий электростатическими и другими силами.
Кроме того, была сделана попытка «снять» с клеток М. smegmatis
93
хитозан с помощью детергентов. Использование 0,1%-ных растворов Твин 20 и Твин 80 для отмывки клеток микобактерий от хитозана, показало, что детергент сам по себе вызывает гибель клеток на 20% (Твин 20) и на 42% (Твин 60). Известно, что аналогичным образом используемые нами детергенты вызывали гибель клеток Ent. agglomeransпри отмывании от хитозана [129].
Еще по теме 3.2.4. Определение прочности связывания хитозана с клетками
M.smegmatis:
-
Автомобили, автомобилестроение -
АЗС, нефтепродукты -
Биотехнология -
Геология -
Дисертации по истории -
Дисертации по праву -
Диссертации по международным отношениям -
Диссертации по праву -
Диссертации по психлогии -
Диссертации по теоретической физике -
Диссертации по экономике -
Компьютеры, радиотехника, электроника -
Мелиорация, рекультивация и охрана земель -
Мода -
Обогащение полезных ископаемых -
Отопление, котлы, водоснабжение, электроснабжение -
Промышленнось России -
Создание сайтов, интернет -
Технологии и средства механизации сельского хозяйства -
Технология мясных, молочных, рыбных продуктов -
Технология производства продуктов животноводства -
Философия -